洋葱亚细胞定位培养电话
作者:思特进2020/3/22 7:12:08





武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。



GaMYB2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A 中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图B 中发现GaMYB2-GFP 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。




以拟南芥金属离子转运体基因AtZIP1(GenBank登录号:AAC24197)的氨基酸序列为信息探针,从水稻(Oryza sativa L.)中分离得到OsZIP7a和OsZIP8两个锌铁转运体基因,OsZIP7a和OsZIP8分别编码384和390个氨基酸残基的产物。OsZIP7a和OsZIP8与ZIP家族成员有着高度的同源性,均包含8个跨膜区,有着高度保守的ZIP结构,在第3和第4跨膜区之间存在一个可变区,可变区富含组氨酸。半定量RT-PCR分析结果表明,OsZIP7a和OsZIP8在水稻根、茎、叶和幼穗等组织中均呈低水平表达;在缺铁处理时,OsZIP7a基因在水稻幼苗根部的表达量增多,而在地上部的表达未明显增多;在缺锌处理的水稻幼苗中,OsZIP8基因的表达量显著增多。构建OsZIP7a::GFP瞬时表达载体,采用农介导法转化洋葱表皮细胞,结果表明,OsZIP7a::GFP定位于洋葱表皮细胞的质膜上。构建酵母表达载体pFL61-OsZIP7a和pFL61-OsZIP8,利用醋酸锂方法分别转入酵母双突变株fet3fet4DEY1453和zrt1zrt2ZHY3中,设pFL61空载体为阴性对照,分别在低铁和低锌的酵母YPD培养基中进行酵母功能互补实验。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。




采用根癌农介导的方法,以农介导丝状真菌遗传转化的载体PCH-sGFP对尖孢镰刀菌甘蓝专化型两个生理小种进行转化,该载体含有报告基因—绿色荧光蛋白基因(gfp)和筛选基因—潮磷酸转移酶基因(hph).获得转化菌株后,经检测表明:T-DNA目的片段成功整合到枯萎病菌基因组中,并且单孢继代培养6代后荧光蛋白仍能稳定遗传.对转化菌株的生长速度和致病力进行分析,结果表明:野生菌株和转化菌株在生长速度和致病力上没有显著差异.因此,转化菌株可用于甘蓝枯萎病菌的组织病理学研究.

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