武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
了红树植物‘白骨壤’中甜菜碱/脯氨酸转运蛋白***(BetlProT2),采用根瘤农介导的方法,将携带有GFP报告***的35S—Bet/ProT2-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞,亚细胞***分析表明,Bet/ProT2是***在细胞质膜上的跨膜蛋白。进一步利用农介导法将Bet/ProT2转人粳稻‘日本晴’,鉴定结果表明,BetlProT2***已经整合到‘日本晴’的***组中并有效表达。转Bet/ProT2***水稻的耐盐性明显提高,在甜菜碱和脯氨酸同时或分别存在的条件下,转***水稻可以在含有150mmol·L^-1N***的液体培养基中正常生长,同时叶片中H2O2含量较低;而野生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎,叶片中H2O2大量积累。结论:红树Bet/ProT2***能通过吸收甜菜碱和/或脯氨酸来降低氧化伤害,显著提高转***水稻的耐盐能力。
谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途径中***为关键的催化酶之一,被称为是植物中无机态N转化为有机态N的“门户”,对植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有着极为重要的影响。高等植物中的GS同工酶主要分为两类:胞质型GS1主要同化从土壤吸收的初级氨及再同化从植物体内各个N循环途径所释放的氨;质体型GS2同化由NO3--N还原而来及光呼吸过程所释放的氨。N素供应对甜瓜的生长发育、果实的产量和品质形成有非常重要的影响,目前甜瓜N素代谢研究还停留在N营***理与果实品质及产量层面,在分子机理水平的研究报道很少,尤其是对与N素同化和利用效率紧密相关的GS酶***的研究还是空白。因此,本文以甜瓜作为对象,在从甜瓜中出胞质型GS***M-GS1的基础上,对M-GS1及课题组到的甜瓜质体型GS***M-GS2的***组拷贝数、表达产物的亚细胞***及生化特性、在甜瓜中的表达调控特征等进行了研究和对比分析,从***、蛋白质和细胞水平对甜瓜GS***进行了系统的功能验证和鉴定,开展了甜瓜N营养代谢的分子生理研究;进而在植株水平研究M-GS1在转***超量表达后提高植株N素同化效率的潜能,为甜瓜GS***的应用、利用GS***改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依据。
综述了根***农介导的遗传转化近几年获得的新进展在转化机理方面,对农自身转录与调控的研究已相当深入,而对有关的植物编码因子的研究也已取得了实质性进展;在转化范围上,对***与裸子植物的转化取得了不少进展,单子叶植物尤其是一些有重要经济价值的禾谷类作物应用农介导相继获得了转化植株;在转化方法方面,发展了新的简单有效的整体植株法,并将T-DNA转移和整合原理结合到***枪等DNA直接转移方法上;***人工染色体与农的联合应用赋予了其大片段DNA转化的功能.针对上述领域,指出了其中仍然存在的一些问题并提出了一些构想.
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