武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
倒置平板,于37℃培养至划线的***菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,植物***原位杂交,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果 裂解***,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。
杂交与显色
杂交将已标记的探针加入预杂交液即成为杂交液(探针浓度为1μg/m1),切片经2×***短暂浸洗后,滴加杂交液,于湿盒内置37℃或42℃孵育过夜。然后依次经2×***室温浸洗1h,l×***室温浸洗lh,0.5×*** 37℃浸洗30min,0.5×***室温浸洗30min。注意滴加杂交液时切片勿干燥。
将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放到位于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。
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