洋葱亚细胞***怎么做-思特进(在线咨询)-亚细胞***
作者:思特进2020/1/2 10:52:14





武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。




以拟南芥金属离子转运体***AtZIP1(GenBank登录号:AAC24197)的氨基酸序列为信息探针,从水稻(Oryza sativa L.)中分离得到OsZIP7a和OsZIP8两个锌铁转运体***,OsZIP7a和OsZIP8分别编码384和390个氨基酸残基的产物。OsZIP7a和OsZIP8与ZIP家族成员有着高度的同源性,均包含8个跨膜区,有着高度保守的ZIP结构,在第3和第4跨膜区之间存在一个可变区,可变区富含组氨酸。半定量RT-PCR分析结果表明,OsZIP7a和OsZIP8在水稻根、茎、叶和幼穗等***中均呈低水平表达;在缺铁处理时,OsZIP7a***在水稻幼苗根部的表达量增多,而在地上部的表达未明显增多;在缺锌处理的水稻幼苗中,OsZIP8***的表达量显著增多。构建OsZIP7a::GFP瞬时表达载体,采用农介导法转化洋葱表皮细胞,结果表明,亚细胞***,OsZIP7a::GFP***于洋葱表皮细胞的质膜上。构建酵母表达载体pFL61-OsZIP7a和pFL61-OsZIP8,利用醋酸锂方法分别转入酵母双突变株fet3fet4DEY1453和zrt1zrt2ZHY3中,设pFL61空载体为阴性对照,分别在低铁和低锌的酵母YPD培养基中进行酵母功能互补实验。

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F-box蛋白通过在UPP(泛素-蛋白酶体途径)中特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、信号转导等生命活动。很多研究结果表明F-box蛋白通过SCF复合体调节多种的信号转导途径,如IAA、JA、GA和乙烯的信号传导,并且与植物对非生物胁迫的响应有很大的关系。故其对植物抗逆性研究有重要意义。鹰嘴豆是世界第三大豆类作物,主要生长在干旱和半干旱地区。它具有生育期短,***组小的特点。经过长时间的进化和对不良环境的适应,鹰嘴豆具有了丰富的耐旱、耐低温和耐盐碱等抗逆***,因此具有其自身的优势来研究植物的抗逆机制。目前,鹰嘴豆在分子生物学方面的研究较为少。 本研究从EST库中挑选到两个F-box蛋白***在干旱胁迫下***表达,亚细胞***公司,采用RACE技术其全长,并对目的***进行了初步的生物信息学分析和转录水平的表达谱分析,旨在为进一步揭示鹰嘴豆F-box蛋白在植物的生长发育及在逆境信号传导中的作用奠定理论基础。 CarF-box1***的开放阅读框(ORF)长1093bp,洋葱亚细胞***怎么做,编码一条345个氨基酸残基的多肽,含有F-box结构域和Kelch结构域。其理论等电点为5.38,分子量为38.37kDa。CarF-box1***不含有内含子。荧光定量PCR分析表明,CarF-box1在鹰嘴豆的根、茎、叶、花、成熟豆和成熟荚中均有表达,在花中表达极高。

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实验室前期研究表明,将来自水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的Harpin蛋白编码***hrf1转化水稻,获得的转***株系NJH12能够提高对水稻稻瘟病、水稻白叶枯病和干旱的抗性。对NJH12表达芯片进行分析,洋葱亚细胞***方法,筛选出大量与受体植株有显著差异表达的***。 OsSsrl (Oryza sativa L. salt-sensitive related gene1, GeneBank登录号为NM_001065574)是NJH12表达谱中的一个表达量上调***,为了进一步分析其序列特征、启动子序列、亚细胞***及在水稻不同***和各种逆境胁迫下的表达模式,通过生物信息学手段、洋葱表皮亚细胞***和Real-Time PCR对其进行研究。序列分析表明OsSsr1的开放阅读框为2004bp,编码一个由667个氨基酸组成并含有5个跨膜区的蛋白,该蛋白N端含有一个信号肽。其启动子序列包含TGACG-motif、ABRE、 TCA-element、Box-W1、W box和Box S等多个与胁迫相关的顺式作用元件。GFP融合表达显示,OsSsrl蛋白***于细胞膜。Real-Time PCR结果表明,OsSsrl***在水稻不同不同***中均有表达,在叶部的表达量,其次为根,在幼穗中的表达量;OsSsrl表达水平受干旱、高温、高盐、低温、机械伤害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的诱导上调。


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