亚细胞***公司-思特进(推荐商家)
作者:思特进2019/12/14 9:04:07





武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。



萝卜(Raphanus sativus L.)是一种重要的十字花科根菜类作物,具有较高的营养价值,在中国乃至世界都有广泛种植。葡萄糖苷是一种重要的植物次生代谢产物,主要存在于萝卜等十字花科植物中。硫苷及其降解产物在植物防御、风味形成以及人类预防中起重要的作用,此外,它还具有作为生物的潜力。MYB转录因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成过程中的关键调控***,其表达量的多少直接影响萝卜中硫苷的含量和分布。调控***的某些特性在拟南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有广泛研究,然而在萝卜研究领域关于MYB28和MYB29的分子特性、表达特征尚未见报道。因此,本以萝卜品种'NAU-ZQH'为材料,通过比对拟南芥中MYB28和MYB29的序列与本实验室萝卜转录组序列,萝卜中调控硫苷合成的两个关键***R***YB28和R***YB29,之后从亚细胞***、转录活性和表达特征等多方面进行研究,以期,增加对萝卜中R***YB28和R***YB29***分子特性和表达特征的认识,为后期通过***改良培育出硫苷含量较高的萝卜新品种提供理论基础。


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本研究旨在通过对根***农侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根***农(A grobacterium tume faciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)***的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS***的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS***瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。

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几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗***防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶***PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞***载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1***于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的***活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根***农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代转***中大量表达,同时叶片接种实验显示PnCHI1转***对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是***于细胞壁的几丁质酶,体外能***几种三七根腐病***,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病***.


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