武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体，研究蛋白质的细胞内***对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体，分别在GFP的N和C端预留位点，以目的***。利用该***载体，分别内切酶Fok I的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白（Fok I：MCP：Fok I，FMF）至GFP的N和C端，得到FMF与GFP的融合蛋白GFP：FMF和FMF：GFP，其中FMF的N端带有细胞核***信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞，观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的***和GFP的表达载体p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞，可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光，而侵染了含核***信号FMF：GFP和GFP：FMF 2种融合蛋白载体的农的细胞，只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞***，具有简单、***和通用性的特点。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

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大豆是重要的油料作物和植物蛋白质资源，在食品工业和农业生产中占有重要地位。大豆花叶病毒病分布非常广泛，是一种世界害，它严重影响大豆产量和外观品质。目前主要通过适当改变播种时期、选用抗病品种、防蚜等措施来降低大豆花叶病毒(***V)对大豆产量的影响，国内外从遗传工程角度来探索抗***V途径的还很少。类甜味蛋白(Thaumatin-like proteins，TLP)是第5类植物病程相关蛋白，在离体条件下具有很强的抑菌活性。以往关于类甜味蛋白的抗病研究都限于抗***，本研究探讨了其与花叶病毒抗性之间的相关性。GmTLP是本研究从大豆品种科丰1号中利用***V诱导的双向电泳技术分离的类甜味蛋白编码***，在大豆中存在两个拷贝，分别命名为GmTLP1和GmTLP2。本文对GmTLP1在植物中的表达及功能进行了初步研究。研究结果如下：1实时荧光定量PCR结果显示，在***V诱导4h、8h、24h、48h时，GmTLP1***在转录水平上的表达量明显上升，说明在mRNA水平上该***是响应***V诱导的，并且响应模式为双峰模式。 2半定量RT-PCR结果显示，GmTLP1在大豆根、茎、叶、荚中均有表达，只是荚中表达量相对低一些。3构建绿色荧光蛋白融合表达载体，利用根***农法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达。

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