华士特生物采用UPLC配合Q Exactive 质谱仪建立了单宁类物质的靶向定量检测方法，该方法检测限低、重复性好、定性定量准确。

业务流程

样本要求

1.取材要求

A 时间一致性原则

同一批次样本取材时间尽量保持一致，控制在1h之内。

B 生理一致性原则

同一批次样本取材生理位置保持一致，例如第四片展开页，第五茎节等。

C 地理位置一致性原则

同一批次样本生长环境保持一致，温室苗、盆栽苗、大田苗应区分。

D 迅速性原则

取材要迅速，需要冷藏或干燥的要快速冷却或失水处理。

2.样品类型

新鲜植物样本：2-10g；固体样本：1-5g；液体样本：0.2-5ml；粪便样本：0.2-2g；土壤样本：5-20g。

3.储存和运输

新鲜样本以干冰运输（以3-4公斤干冰挥发一天计算，请使用足量的干冰运输）。

单宁种类很多,分子结构复杂,差异也大,但可分成二大类:可水解鞣质(单宁酸, tannin acid )与缩合鞣质(condensedtannin)两种。

可水解鞣质具有酯式或甙式结构,大多数由没食子酸( Gallic acid )或其衍生物与葡萄糖结合而成,糖上的每一个醇羟基都与没食子酸上的一个羟基结合成酯，可被酸、碱、酶水解。含这类鞣质的***有没食子、石榴果皮等。水解鞣质在医l药上已提纯应用为消l炎收敛药,名鞣酸。没食子酸( Gallic acid )及单宁酸(可水解鞣质, tannin acid )标准品可以获得,可以利用HPLC分析、定量。

缩合鞣质-般由***素( Catechin )组成,结构复杂,不能水解,加酸加热能产生一种缩合物质- 鞣酐(或名鞣红Phlobaphenes) , ***中的鞣质多数属于缩合鞣质。对五倍鞣质的结构有不同看法,一般认为代表性的结构式为 五-间双没食子酰葡萄糖。因为没有固定的聚合度,因此分析起来比较棘手。

针对于缩合鞣质, -般分析思路为:

1.通过酸解将缩合单宁水解为黄酮类单体,再通过HPLC分析单体的重量及含量;

2、通过13C-NMR分析缩合单中中可能存在的键合结构;

3、通过MALDI-TOF分析缩合单宁的聚合度;

4、即使经过上述步骤,只能获得缩合单宁的单体信息,键合信媳聚合度,亦杯能解析缩合单单的缩合顺序。