武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域
7.为什么有的***盒是采用竞争ELISA法?
小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗1体夹心法进行测定,可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗1体愈少,后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。
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机体被微生物感1染后,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。
IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。
1.3 抗原抗1体反应
1.3.1 可逆性
抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。
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2. ELISA的类型
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗1体。在这种测定方法中有三个必要的***:(1)固相的抗1菌素原或抗1体,BDNF ELISA***盒,即'***吸附剂'(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗1体,称为'结合物'(conjugate);(3)酶反应的底物。根据***的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:
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