武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

ELISA***盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

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3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，IgA ELISA***盒，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

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1.3.4　敏***

在测定血1清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，***测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的***测定的敏感度可提高数千倍，达ng/ml水平。例如，用放1射***测定法或酶***测定法测定HBsAg，其敏感度可达0.1ng /ml。

1.4　***测定在临床检验中的应用

由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制备特异性的抗血1清或单克1隆抗1体，利用此抗1体作为***就可检测标本中相应的抗原，因此***测定的应用范围极广，在临床检验中可用于测定：

1) 体液中的各种蛋白质，包括含量极1少的蛋白质如甲胎蛋白等。

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