IgM ELISA***盒-默沙克(推荐商家)
作者:默沙克2020/7/1 17:34:17





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1.2.1 抗1体的结构

抗1体是能与抗原特异性结合的***球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与***测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu )链。

重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。



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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,IgM ELISA***盒,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。



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6.酶***测定

酶***测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶***测定方法在1971年1初建立时称为酶联***吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联***吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。



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