武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

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7.为什么有的***盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗1体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗1体愈少，后的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。

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2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，EGF ELISA***盒，拍干。

5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。

6. 温育：操作同2。

7. 洗涤：操作同4。

8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。

10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

武汉EGF ELISA***盒-武汉默沙克生物科技(图)由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司（www.mskbio.com）是湖北 武汉 ,生***工的企业，多年来，公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在默沙克***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈，共创默沙克更加美好的未来。