武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

　4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清，包被和酶标用的抗1体***1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆抗1体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应，作一步检测。

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3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，酶联******盒代测，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

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