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计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

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7.为什么有的***盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗1体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗1体愈少，***后的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。

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4） 吸取匀浆液到离心管，4℃ 5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

6、 尿液、唾液等其他液体生物样本

1000×g离心20min，取上清即可检测。

总的来说，因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。

为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本***1好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。

另外，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会***HRP的活性，从而导致假阴性的结果。

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