武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，TPO ELISA***盒，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低，孵育时间过短 提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 ***超过有效使用期 及时更换*** 操作中，滴加***时缓冲液未沥干，致 使***稀释 每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 ***中无抗原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误

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1.　ELISA的原理

　　ELISA的基础是抗原或抗1体的固相化及抗原或抗1体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗1体仍保持其***学活性，酶标记的抗原或抗1体既保留其***学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗1体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗1体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗1体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗1体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了***反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。

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（1）分子结构不同：BNP的分子结构中有一个非常重要的二硫键连接构成的环状结构，可与钠尿肽受体结合发挥生物学活性作用；NT-proBNP为一直链结构，是失去生物活性的氨基酸片段。

（2）在体内的清除途径不同：BNP的清除主要通过与钠尿肽清除受体（NPR-C）结合继而被胞吞和溶酶体降解，只有少量的BNP通过肾1脏清除，当肾1功能缺失时，中性肽链内切酶（NEP）也可打开BNP的环状结构而对它进行清除；NT-proBNP清除的唯1途径是肾小球滤过，肾1功能出现缺失对NT-proBNP的代谢影响极大。

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