武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

【预期用途】

适用于酶联***反应中的显色阶段。

【检验原理】

原理是应用酶联***学基本原理——当标记在抗1体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应，加入终止液后溶液由无色变成***，***深浅反应ELISA体系中抗原抗1体结合的多少，从而判断某种抗原或抗1体的多少。在通过酶1标仪测读吸光值，判断***反应的程度。

【主要组成成份】

底物显色液A液：柠檬酸，30%H2O2

底物显色液B液（避光保存）：EDTA-Na，柠檬酸，甘油 ，TMB。

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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，LIF ELISA***盒，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

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1.3.2　***适比例

在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物（沉淀）的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围，称为等价带（zone ofequivalence）。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩，则无沉淀物形成，在***测定中称为带现象（zone phenomenon）。抗1体过量称为前带（prezone），抗原地过量称为后带（p1ostzone）。在用***学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗1体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。

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