武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
4.细胞上清液样本如何处理?
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。
5.细胞裂解液样本如何处理?
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎,以使细胞***并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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⑦切成的蜡带到20-750px长时,右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,以免卷曲,并牵引成带,平放在蜡带盒上,靠刀面的一面较光滑,朝下,较皱的一面朝上。
⑧用单面刀片切取蜡片一小段,放在载玻上加水一滴,置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。
⑨切片工作结束后,应将切片刀取下用氯1仿擦去刀上沾着的石蜡,把切片机擦拭干净妥为保存。
9. 展片、贴片
打开水浴锅,使水温维持在40-45℃,另准备30%乙醇溶液。
② 切片时,将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。
② 用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带,放在乙醇溶液的水面上,使切片展开。(可省)
③小镊子轻轻地将连在一起的切片分开,用一个载玻片将切片完整,已展开的切片捞至温水中,使之充分展开。
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17.脱水Ⅱ
将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min。***后用吸水纸吸干多余的乙醇。
18.透明
切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。
二甲本应尽量保持无水,应经常更换,IgM ELISA***盒,或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象,说明脱水未尽,应退回乙醇中重新脱水,否则切片难以镜检。
19.封藏:中性树胶封存
因切片经二甲本透明,使用中性树胶作为封藏剂,树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。
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