武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
机体被微生物感1染后,酶联******盒价格,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。
IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。
1.3 抗原抗1体反应
1.3.1 可逆性
抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。
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在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合,而不再形成'夹心复合物'。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗1体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法***测定标本中含量可异常增1高的物质(例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的***1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类***可削弱钩状效应。
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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4. 确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。
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