武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
本实验选择豌豆为材料,豌豆(Pisumsativum)属豆科植物,是粮食、饲料和重要的蔬菜作物,也是遗传学家和植物生理学家感兴趣和乐于采用的实验植物,豌豆的根、茎、子叶、下胚轴、上胚轴、花芽等外植体,皆可形成愈伤***,其中茎尖、幼胚、幼叶等器1官可成功的再生成植株。茎尖培养可包括小至十几微米的茎尖分生***(生长点)和大至几十毫米的茎尖或更大的芽培养。在实践应用上,常采用生长点的培养使患病植物去病毒,以达到挽救优良品种,提高产量和质量之目的。
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1.2.1 抗1体的结构
抗1体是能与抗原特异性结合的***球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与***测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu )链。
重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。
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3. 洗涤
材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。(20,elisa,30,30,60)
4. 脱水
材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水,各30min
注意事项:
(1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。
(2)在更换高一级的脱水剂时,***1好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。
(3)在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使***变软,助长材料的解体。
(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使***变脆,影响切片。
(5)如需过夜,应停留在80%酒精中。
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