武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
1.取材
切取的***块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以6mm×6mm×5mm为宜。
注意事项:
(1)取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免***细胞的成分、结构等发生变化。
(2)切片材料应根据需要观察的部位进行选,尽可能不要损伤所需要的部分。
2.固定
将切好的***用生理盐水***洗3次,立即投入10%中性1福尔1马林固定液或4%多聚甲醛中固定,固定36小时。
注意事项:
(1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。
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ELISA***盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测***盒、ELISA Kit、酶联******盒、酶联***吸附测定***盒、酶联***分析***盒、酶免***盒等,比较常见的叫法是ELISA检测***盒、酶联***吸附测定***盒等。ELISA***盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
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假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。
双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗1体,原装elisa***盒,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗1体和酶标抗1体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的***,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响,已被列为这类***的一项考核指标(参见6.2)。
双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
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