武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
实验目的
植物细胞和***培养的技术性强,要求无菌操作,通过本实验可初步掌握常规的***培养技术,加深对无菌操作的了解。
二.实验原理
植物的性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力,称为植物的性。
植物***培养就是利用植物的性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物***培养按其原始意义,就是指愈伤***培养。但发展至今,其范围日益扩大,已包括植物和它的离体器1官、***、细胞和原生质体的离体无菌培养。因此,拥有几种不同水平的培养技术,即整体的、器1官的、***的、细胞的和原生质的培养技术。
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采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免***污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
2、 血浆
用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血1脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读***盒说明书,检查***盒是否对抗凝剂有特殊要求。
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3. 洗涤
材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。(20,30,30,60)
4. 脱水
材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水,各30min
注意事项:
(1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。
(2)在更换高一级的脱水剂时,***1好不要移动材料以免损坏,ACE ELISA***盒,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。
(3)在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使***变软,助长材料的解体。
(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使***变脆,影响切片。
(5)如需过夜,应停留在80%酒精中。
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