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假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。

　　双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab'）或Fab片段作酶结合物的***，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。

　　双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

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NT-proBNP是BNP激1素原分裂后没有活性的N-末端片段，与BNP相比，半衰期更长，更稳定，其浓度可反映短暂时间内新合成的而不是贮存的BNP释放，因此更能反映BNP通路的激1活。1血浆NT-proBNP水平随心衰程度加重而升高。50岁以下的***血浆NT-proBNP浓度450pg/ml诊断急性心衰的敏***和特异性分别为93％和95％；50岁以上的人血浆浓度900pg/ml诊断心衰的敏***和特异性分别为91％和80％。

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三．实验材料

仪器设备：1．酒精灯、三角烧瓶，培养皿；2．镊子、剪刀、剖针；3．双筒解剖显微镜；4．光照培养箱或温室；

材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。

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（1）MS培养基，植物激1素：NAA、6-BA等；

（2）饱和漂液（次氯1酸钠）；

（3）70%酒精、100%酒精、酒精棉球；

（4）无菌水

四．实验步骤

豌豆苗的茎尖培养

⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株，简取1厘米左右的茎尖，浸入70%的酒精中1分钟，酶联******盒现货，再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。

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