武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

ELISA***盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血1清析出。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

ELISA***盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测***盒、ELISA Kit、酶联******盒、酶联***吸附测定***盒、酶联***分析***盒、酶免***盒等，比较常见的叫法是ELISA检测***盒、酶联***吸附测定***盒等。为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本***1好在1~6个月内检测。ELISA***盒自从60-70年代问世以来，得到全世界科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。

1.2.1　抗1体的结构

抗1体是能与抗原特异性结合的***球蛋白(immunoglobulin,Ig)。1、血1清血1清是***1常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。Ig分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与***测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig的轻链是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）两种型别。五类Ig的重链结构不同，这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ（gamma）链和μ（mu ）链。

重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异，称为可变区，分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位，只与相应的抗原决定簇匹配，发生特异性结合，是抗1体专一性结合抗原的结构基础。

12．水洗

用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝（或放入碱性水中也可），但要注意流水不能过大，以防切片脱落。

13．分化

将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色，约2秒至数十秒钟。见切片变红，颜色较浅即可。

14．漂洗

切片再放入自来水流水中使其***蓝色。

15．脱水Ⅰ

切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各5min。

16、复染

用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。

伊红主要染细胞质，着色浓淡应与苏1木1精染细胞核的浓淡相配合，如果细胞核染色较浓，细胞质也应浓染，以获得鲜明的对比。脑钠肽是心脏细胞产生的结构相关的肽类激1素家族钠尿肽中的一种。反之，如果细胞核染色较浅，细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染，促使细胞质容易着色，并且经乙醇脱水时不易褪色。