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把微生物细胞混悬于含保护剂（20%甘油，10%DMSO等）的液体培养基中（也可把含菌琼脂块直接浸入含保护剂的培养液中），分装入耐低温的安瓿瓶中后，作缓慢预冷，然后移至液氮罐中的液相（-196℃）或气相（-156℃）作长期超低温保藏。

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要轻拿轻放，防止碰撞挤压，移动时不可在地面拖拉，要抬起来。平时要存放在干燥、透风良好的房间，防止湿润。

罐内压力达到排液要求时即可排液，为保证储存介质的纯度，并减少下次充填时介质液体的损耗，一般不应将储罐全部排空，应保留10升左右的液体。

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包含制冷剂的内部容器由不锈钢材质制成或铝合金由于大部分的延展性丧失在低温下其他相对价格较低的材料。通常是这样覆盖多层或粉末类型的绝缘材料。内部容器和绝缘体将被封闭在由碳钢或不锈钢制成的真空夹套中；钢铁被用于保护容器和绝缘材料的情况下一场火灾。

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