如何预防细胞老化?1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的***作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时,也要特别注意冻存细胞,以保持细胞有种子存在,可以有效避免细胞损伤。
RPMI-1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和细胞、特殊造血细胞、正常的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。McCoy's 5A Medium 早是用于肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如皮肤、肺等)的原代细胞的生长。除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作***活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢,常见的检测方法几种:1.分离培养法,将疑样本接种到支原体培养基中,观察菌落生成。缺点:培养时间长,须3~5周才能判断。2.DNA荧光染色法,利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染,但若有些细胞易有荧光背景,可能会干扰结果判读。3.PCR法,利用特异性引物,经PCR反应检测支原体DNA,灵敏且快速。BI EZ-PCR支原体检测***盒:采用PCR法,简化了细胞培养中支原体污染的检测过程,可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。
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