将细胞冻存管由液态氮中取出,置于室温回温,不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养 基、无菌15ml离心管、培养瓶。在生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。 倒去上清液,重悬细胞,移到培养瓶中培养。
RPMI-1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和细胞、特殊造血细胞、正常的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。McCoy's 5A Medium 早是用于肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如皮肤、肺等)的原代细胞的生长。除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作***活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
蛋白质(protein)是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占***重量的16%~20%,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。
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