若您养的是贴壁细胞，请先将细胞消化下来；若是悬浮细胞，请直接按以下步骤进行：1. 以200-300g离心3分钟，收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬（不需回温），将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml，添加到冻存管中（一般每管1ml）。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中，置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜（或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后，建议检测细胞存活率。

如何避免细胞抱团？细胞生长密度不要太高，70%－80％就好（细胞刚刚基本成单层细胞，没有出现成层生长），这样细胞抱团的几率就大大减少了。如果细胞已经长成集落，可先将细胞低密度传代，第二天再消化传代，这样连续传三次，细胞抱团的就越来越小，这样几代过后，再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个的。用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞。

CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞；当CFSE扩散穿过细胞膜，会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发，发出绿色荧光，这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合，形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖，胞内荧光蛋白会被平均分配到下一代细胞中，因此细胞荧光强度会随着增殖代数增加而不断地降低，可用流式细胞仪进一步侦测分析得出细胞分裂增殖的情况。CFSE的浓度，对于终判断细胞增殖结果有直接性的影响！

细胞质不是凝固静止的，而是缓缓地运动着的。在只具有一个***液泡的细胞内，细胞质往往围绕液泡循环流动，这样便促进了细胞内物质的转运，也加强了细胞器之间的相互联系。细胞质运动是一种消耗能量的生命现象。细胞的生命活动越旺盛，细胞质流动越快，反之，则越慢。细胞死后，其细胞质的流动也就停止了。细胞中还有一些细胞器，它们具有不同的结构，执行着不同的功能，共同完成细胞的生命活动。这些细胞器的结构需用电子显微镜观察。在电镜下观察到的细胞结构称为亚显微结构。