一般客户拿到细胞后，应该注意什么？

客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞 100X，200X 各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，莆田胰酶，未超过 80%汇合度时，胰酶公司，将培养瓶中培养液吸出，留下 10ml 培养液继续培养；超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000 转/分钟离心 2 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

细胞培养的污染源:微生物污染：微生物污染的原因可分为2个阶段：实验准备阶段和实验操作过程。准备阶段的原因包括：实验耗材灭菌不彻底；细胞房清洁度不够，增加微生物污染风险；超净台洁净度不够，消毒不够彻底，紫外线没有预先照射足够时间，表面没有用酒精擦拭；没有带无菌乳胶手套；***本身已经污染，没有检测出来。实验操作中的污染，往往是不够严谨，粗心大意造成，如：手从无菌***的上方经过；移液器操作不当，液体接触到移液器前端；移液管吸液过猛；枪头没有更换，胰酶报价，较差污染等。不同的微生物污染物对细胞的影响也有差别，微生物中支原体和病毒对细胞形态和技能的影响是长期的，胰酶多少钱，缓慢的和潜在的。而霉菌和***增殖迅速，能在很短的时间内***细胞生长或产生***物质杀灭细胞。

细胞培养在实验过程中污染的原因:

1、***：***在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感ran***的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。

2、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感ran，国内***很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛***中***常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体gan染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢凋亡。

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