要说为什么很多细胞培养的科研人都用到胎牛***,那就不得不说说胎牛***那极为重要的作用。
1.提供维持细胞指数生长的***,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别***、脂类、金属和其他***等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与***金属和热原质结合,起到解du作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
如何提取胎牛***白蛋白的!
一、所需材料,胎牛***取近郊屠宰场,以柠檬酸三钠为抗凝剂,血液采集后随即分离出血浆备用。需要的***有***白蛋白;xiu jia酚氯;醋酸纤维素薄膜,其余***均为分析纯。提取胎牛***白蛋白需要准备 LG-6型大容量冷冻离心机,DF-C型电泳仪,UV-754型紫外可见分光光度计,PHS-2型酸度计。
二、具体方法,白蛋白含量测定 采用xiu jia酚氯法,以胎牛***白蛋白为标准. 白蛋白纯度的测定 采用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定 用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10 g/L时牛***白蛋白的光吸收值,用A403表示。
***在细胞培养中的鉴别作用
对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、gu髓样细胞可以释放蛋白酶,***中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用***来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。***蛋白形成了***的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。***还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解du中起重要作用,如SeO3,硒等。
在选购胎牛***问题上我们还是从以下几点来分析:
1、渗透压——使用凝固点降低的方法检测渗透压。我们每天使用美国***标准技术研究所标定的标准溶液对我们的渗透压检测仪器进行校准。
2、测定pH值——同样每天使用美国***标准技术研究所标定的标准溶液对pH计进行校准
3、电泳图谱——鉴定***的整体性质。样品被加到醋酸纤维素介质中并在缓冲体系内迁移。条带经染色、清洁、干燥后用密度仪进行扫描以检测白蛋白和球蛋白组分的相对浓度。
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