培养基培养方法

1.灭菌，按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被***，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

2.摆斜面，灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

3.贮存，培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

***在细胞培养中的鉴别作用

提供基本营养物质：氨基酸、***、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。提供***和各种生长因子：胰岛素、shen上腺皮质***（di塞米松）、类固醇***（雌二醇、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带***、脂肪、以及***等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

细胞培养的污染源:微生物污染：微生物污染的原因可分为2个阶段：实验准备阶段和实验操作过程。准备阶段的原因包括：实验耗材灭菌不彻底；细胞房清洁度不够，增加微生物污染风险；超净台洁净度不够，消毒不够彻底，紫外线没有预先照射足够时间，表面没有用酒精擦拭；没有带无菌乳胶手套；***本身已经污染，没有检测出来。实验操作中的污染，往往是不够严谨，粗心大意造成，如：手从无菌***的上方经过；移液器操作不当，液体接触到移液器前端；移液管吸液过猛；枪头没有更换，较差污染等。不同的微生物污染物对细胞的影响也有差别，微生物中支原体和病毒对细胞形态和技能的影响是长期的，缓慢的和潜在的。而霉菌和***增殖迅速，能在很短的时间内***细胞生长或产生***物质杀灭细胞。