如何提取胎牛***白蛋白的！

一、所需材料，胎牛***取近郊屠宰场，以柠檬酸三钠为抗凝剂，血液采集后随即分离出血浆备用。需要的***有***白蛋白；xiu jia酚氯；醋酸纤维素薄膜，其余***均为分析纯。提取胎牛***白蛋白需要准备 LG-6型大容量冷冻离心机，DF-C型电泳仪，UV-754型紫外可见分光光度计，PHS-2型酸度计。

二、具体方法，白蛋白含量测定 采用xiu jia酚氯法，以胎牛***白蛋白为标准. 白蛋白纯度的测定 采用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定 用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值，然后折算成浓度为10 g/L时牛***白蛋白的光吸收值，用A403表示。

细胞培养在实验过程中污染的原因:1、***：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些***开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。***生长的比较慢，不象***那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。2、病毒：***细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴shen细胞的培养中已发现不少于20种***性bing毒。尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产yi苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和yi苗、干扰素等生物制品制作中的难题。


***中的沉淀物对细胞培养有什么影响？污染。磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争duan，研究者可能会在***中观察到一些 絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将***放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定***被污染了。并且当研究者将***样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是***被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但***终确定***没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将***放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将***加到琼脂板上进行培养以观察是否有***生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。


细胞培养的污染源:化学性污染：培养环境中许多化学物质都可以引起细胞的污染。化学物质并不总是***细胞的生长，某些化学物质如***就可促进细胞的生长。未纯化的物质、***、水、***、生长辅助因子及储存***的容器都可能成为化学性污染的来源。为了避免金属离子、有机分子、细胞内du素等物质对水的污染，在配制液体，清洗容器时必须使用不含杂质的超纯水。细胞培养使用的所有物质都应是高纯度的，并经过机构的鉴定，实验者本人也应对上述成分进行纯度鉴定。同时，正确配置和储存培养液及***也是非常重要的，应该采取标准的操作步骤，避免液体体积计算错误，混用类似化合物等错误。