培养基培养方法

1.灭菌，按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被***，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

2.摆斜面，灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

3.贮存，培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

细胞培养在实验过程中污染的原因:黑胶虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的***养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换***外无须特殊处理。


细胞培养的污染源:化学性污染：培养环境中许多化学物质都可以引起细胞的污染。化学物质并不总是***细胞的生长，某些化学物质如***就可促进细胞的生长。未纯化的物质、***、水、***、生长辅助因子及储存***的容器都可能成为化学性污染的来源。为了避免金属离子、有机分子、细胞内du素等物质对水的污染，在配制液体，清洗容器时必须使用不含杂质的超纯水。细胞培养使用的所有物质都应是高纯度的，并经过机构的鉴定，实验者本人也应对上述成分进行纯度鉴定。同时，正确配置和储存培养液及***也是非常重要的，应该采取标准的操作步骤，避免液体体积计算错误，混用类似化合物等错误。