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作者:生物试剂2020/3/7 20:48:28





分离酶Sortase A (SrtA)起源于金***pu萄球菌,可催化分选肽(LPETG)与寡聚甘氨酸之间的共价连接。近年来,已有报道称SrtA用于监测小鼠特异性受体-配体介导的免yi细胞相互作用。然而,这种方法需要将SrtA和寡聚甘氨酸融合到相互作用的配体和受体细胞上,因此需要预测细胞相互作用的类型,同时对两种细胞进行***修饰,因此无法pu捉细胞间未知的相互作用。为了突破这一瓶颈,陈鹏的研究组设想了一种未知细胞的标记方法。由于约5%的细胞表面蛋白含有N端单一甘氨酸,他们希望获得一种标记单个甘氨酸N端氨基的分选酶,从而使任何细胞都能被标记。为此,他们建立了SrtA定向进化的高通量荧光筛选平台,成功地获得了一种高活性的SrtA突变体mgSrtA,它可以标记单一甘氨酸,能够有效di标记任何细胞类型。




为了证实小鼠细胞中确实存在DNA不稳定性,研究人员使用了另一种验证技术:在细胞中,如果染色体断裂,很容易形成"微核"结构。换句话说,通过计算微核数目是否发生了变化,我们可以知道小鼠的DNA是否真的更不稳定。实验结果证实了研究者的猜测。结果表明,缺乏ALDH 2的小鼠微核数量增加了2.9倍。研究人员进一步敲除了小鼠的FANCD 2***。这是一种DNA交联修复蛋白,有助于不稳定的DNA修复。一旦该***被敲除,小鼠的微核数就会增加9.5倍,染色体的形态也有显著差异。




无***培养基,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加***,但是在某些应用中可能要添加生长因子或xi胞因子。无***培养基中添加了***的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和***等,能减少***带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。经历了天然培养基、合成培养基后,无***培养基和无***培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无***培养可简化纯化和鉴定各种细胞产物的程序,避免病毒污染造成的危害。




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