初代培养:消毒后用无菌刀剥取5mm左右大小的茎尖,迅速接入MS 6-BA 1.0mg/L IBA 0.1mg/L培养基中,火焰南天竹种苗,每瓶接种1个外植体,接种50瓶,重复3次。
增殖培养:培养60天后,将小于0.5厘米的不定芽直接转接,大于0.5厘米新芽(梢)切割成0.5~1厘米左右的茎段转接,每瓶接种15个,接种50瓶,重复3次。培养60天观察增殖情况。
内生菌***:植物体中的内生***潜伏得较深,表面消毒无法将其消除。这种污染在外植体初期培养中(前几代的继代培养)不易被肉眼察觉,随着继代次数的增加,植株体内***逐渐累积,在培养基上显现出来。
内生菌不能被一般的表面消毒方法所消除,它将随着材料进入培养过程,火焰南天竹苗,引起不同程度的污染,产生程度不一的危害,在早期往往会导致培养失败,增殖率降低,培养物生长减缓,玻璃化苗增加等;后期则导致试竹苗移栽困难和死网。南天竹为常绿灌木,在外植体接种时往往因为消毒不彻底而将内生菌带入培养体系。
试验中,笔者采用添加青霉苏G-K来***内生菌,火焰南天竹,虽有一定的***效果,但因青霉速不能高温灭菌而不能直接添加到培养基中,北京火焰南天竹,这为种苗工厂化繁殖生产带来了不便;50%的多菌灵可湿性粉及能直接添加到培养基中进行高温灭菌,对南天竹的内生菌***有显著作用,且成本低廉。
生根物质效应:高生根频率分别比禁乙算和吲多丁酸处理高9.7%和4.8%在本试验范围内使用生根粉对诱导木本植物火焰南天竹生根并促进生长的作用较为明显,可能是因为添加的ABT生根粉兼具补充植株外源生长素、促进内源生长素合成的双重***能更好地促使根原基分生***细胞的分化,促进插穗特别是较难生根植物根系的形成。
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