聚合酶链式反应(PCR)

操作步骤

1.在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

1QPCR buffer

5 μl

dNTP mix( 2mM )

4 μl

引物1(10pM)

μl 2

引物2 ( 10pM)

2μl

Taq酶(2U/ul)

1 μl

DNA模板( 50ng-1μg/μl )

1 μl

加ddH2O至

μl 50

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上执行扩增。-般:在93°C

预变性3-5min ，进入循环扩增阶段: 93°C 40s→58°C 30s→72°C 60s ，循环30-35

次，后在72°C保温7min。

3.结束反应，分子生物检测公司， PCR产物放置于4°C待电泳检测或-20°C长期保存。

4. PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油，需用100ul进行抽提反应混合液，以

除去石蜡油;否则，直接取5- 10μl电泳检测。

分子生物学服务

公司建有100平米分子实验室，配备有PCR仪、定量PCR仪、电泳仪、恒温培养箱、恒温摇床、垂直电泳仪、蛋白转印仪、蛋白发光成像仪等设备。分子组技术人员毕业于中国农业大学、华中科技大学同济***院、浙江理工大学等高校生物***相关***，全部具有硕士研究生以上学历，熟练掌握分子生物学相关实验，可开展多种分子生物学检测服务。

分子实验室部分设备

线粒体测序

线粒体是真核生物的重要细胞器，是生物体的能量工厂，参与能量代谢、信号转导、细胞凋亡等许多生命活动，对生物的生理活动起着至关重要的作用。大部分线粒体***由于其母系遗传特性以及进化速率较快等特点，被广泛地用于种群遗传学、进化生物学、谱系地理学和系统发育学、***诊断等学科领域。线粒体全***组在生物进化的研究中具有独特的优势。由于线粒体有着与真核生物长期共生的进化历史，因此其***组包含了反映物种进化的关键信息，同时，快速分子生物检测，相对于核***组，分子生物检测技术，线粒体***组小，南京分子生物检测，容易对大量物种进行横向的比较分析，有利于生物进化的研究，因而受到进化生物学家的钟爱。线粒体的组成可以从两个层面上反映物种及群体的遗传和进化，即核酸序列组成和***组的结构特征，两者的特征具有不同的进化机制和进化速度，在进化生物学研究中可以很好的互补。

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