动物实验动物性别的鉴定

1、大、小鼠的

离乳仔鼠主要以与之间的距离长短及与有无被毛为标志。识别要点是：①雄性的与之间的距离较远，雌鼠较近；②雄性的与之间有毛；③雄性的突起较雌鼠大；④雌鼠较雄鼠明显。成熟后，雄性可见，雌性明显而易于区分。

2、豚鼠的

豚鼠的主要是通过形态来判断。雌性外突起比较小，南京实验外包，用拇指按住突起，余指拨开大的皱褶，可见口呈”V”形（注意发情间期的闭锁现象，即一种除了发情和分娩时外，实验外包代做，关闭口的细胞结构）；雄性外有覆盖的隆起，用拇指按住其基部，可见向外突出。

3、兔子的

幼兔的主要以开口部与之间的距离及开口部的形状来判别。哺乳期仔兔，雄性开口部与之间的距离较远，为雌性的1.5－2倍，雌性较近。雌性开口扁形，大小与同；雄性圆形，实验外包费用，略小于。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，翻出可见呈圆柱体的突起；雌性生殖孔呈Y形，翻出仅见有裂缝，裂缝及于。3月龄以上成年兔，雄性明显而雌性无；雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

鸟类在第二性征如肉冠、羽毛、发声出现前，区分性别极为困难，但可以通过孵出时24小时内进行外翻泄殖腔鉴别。雄性中可观察到微小而能的孔突上有输精管开口，但此法不仅要有丰富的经验，而且准确性常难以。

1、***：

识别：***在显微镜下为黑色细沙状，根据gan染***的不同，可有不同的外形。只要发现培养液浑浊变黄，培养瓶顶部有一层细沙一样的东西。就知道大事不好啦。

处理：可在培养液中加相应的抗sheng素处理。可以用四环素，庆大mei素，或者链mei素，前两者的工作浓度是50 μg/mL；链mei素的工作浓度是100 μg/mL。其实，毛毛虫说句实话，一旦发生污染，如果细胞不是特别特别珍贵的话，还是趁早扔了。

2、霉菌

识别：因为培养液是清亮的，所以霉菌污染非常难以早期发现，等发现时往往已经为时过晚了。培养液中慢慢地出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，如同风中柳絮。细胞仍可生长，但时间一长，细胞的状态就变差。

处理：细胞一旦被霉菌污染，很难挽救，建议果断舍弃该污染细胞，将环境消毒。

采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新洁尔灭擦洗一遍。把水盘里加上饱和量的***铜。

3、支原体：

识别：多为多边形，培养液一般会变浑浊。支原体细胞以后，细胞病变不很明显，支原体污染后，可影响的细胞生长参数。故进行实验前，确认细胞为mycopla***a-free，实验结果之数据方有意义。

处理：没有什么好处理的。直接扔了吧。

4、黑蛟虫：

识别：据说是纳米级的***。低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去。培养液也是不浑的，一般不会太影响。但是如果太多了，也会影响细胞生长和实验结果。

处理：因为根本不知道这是什么物种，所以也谈不上什么处理方式。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。

5、***：

识别：***污染和霉菌污染差不多。一般培养液清亮，所以很难早期发现。镜下有时候象丝状，有时候象珊瑚状。慢慢地会长出很细的黑色丝状物。这个时候，已经晚了，细胞很难救活了。

处理：同霉菌污染一样，没有什么好处理的，直接扔了吧。然后消毒灭菌培养间，CO2孵箱，器皿和培养液。

1．选择合适的转染***

不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染***。每种转染***都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择适合实验设计的转染***。当然，适合的是gao效、低毒、方便、廉价的转染***。

2．保持佳的细胞状态

一般低的细胞代数（lt;50）能保***型不变。适合转染的细胞是经过几次传代后达到指数生长期的细胞，细胞生长旺盛，容易转染。细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变，总染色体重组或***调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。也就是说同一种系的细胞株，在各实验室不同培养条件下，其生物学性状发生不同程度的改变，导致其转染特性也发生变化。因此，如果发现转染效率降低，可以试着转染新鲜培养的细胞以***较佳结果。

3．选择gao效的转染方法

不同转染***有不同的转染方法，但大多大同小异。转染时应跟据具体转染***推荐的方法，但也要注意，因不同实验室培养的细胞性质不同，质粒定量差异，操作手法上的差异等，其转染效果可能不同，应根据实验室的具体条件来确定较佳转染条件。

4．所构建载体的质量。

转染载体的构建（病毒载体，质粒DNA，动物实验外包推荐，RNA，pcr产物，寡核苷酸等）也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞gan染效率较高，但不同病毒载体有其特定的宿主，有的还要求特定的细胞周期，如逆转录病毒需侵染分裂期的宿主细胞，此外还需考虑一些安全问题（如***污染）。除载体构建外，载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响，如前面提到的超螺旋及线性DNA对瞬时和稳定转染的影响。如果***产物对细胞***性作用，转染也很难进行，因此选择组成或可调控，强度合适的启动子也很重要，同时做空载体及其它***的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。

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