细胞培养的条件

培养基

细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、***等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

其他添加成分

在各种合成培养基提供基础营养物质之外，还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分，如xue清、因子等。

xue清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质，常用的是胎牛xue清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加xue清的比例。10%～20%的xue清能维持细胞较快的生长增殖速度，称为生长培养液；为维持细胞缓慢生长或不死，添加2%～5%的xue清即可，称为维持培养液。但xue清中也存在***于细胞生长和繁殖的物质，如补体、mian疫球蛋白和一些生长***因子；成分不明确，影响对结果的分析；不同动物、不同批次的xue清活性差别较大，影响培养效果的稳定性。

谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源，在细胞生长代谢过程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解，4下放置7天即可分解约50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。

实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。

实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。

每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。

预防细胞污染的注意事项

操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，实验外包哪家好，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。

CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，实验外包公司，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。

定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

动物实验中种属的选择( genus excerpt)

根据不同的实验目的，选择相应的种属。不同种属的动物对于同一***的刺激是有不同的反应程度的。例如在进行***反应或反应实验时，应豚鼠，而做发热、热原检定、解热药的实验时应选择家兔、犬。家免、大白鼠常用于研究、小白鼠则宜进行各类的实验研究。总之，实验外包，在选用实验动物时，应尽可能选择其结构、功能和代谢特点接近于人类的动物。

判断动物是否健康，应掌握以下原则：

1.一般状态发育良好，反应灵活，食欲好，眼睛有神，不打喷嚏，鼻粘膜无分泌物等。

2．皮毛颜色动物皮毛要光洁柔软，南京实验外包，无脱毛、蓬乱和***的现象。

3．腹部呼吸动物腹部呼吸均匀，无膨***起的现象，无稀便无分泌物。

4．爪趾特征动物无咬伤、***、结痂等情况。

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