动物实验外包服务分子生物学检测,南京英瀚斯生物科技
作者:英瀚斯2020/10/26 3:55:14






正确地评估动物***模型

应该懂得没有一种动物模型能完全人类***真实情况,动物毕竟不是***的缩影。模型实验只是一种间接性研究,只可能在一个局部或几个方面与人类***相似。因此,模型实验结论的正确性只是相对的,终必须在***身上得到验证。过程中一旦出现与人类***不同的情况,必须分析其分岐范围和程度,找到相平行的共同点,正确评估哪些是有价值的。






阑尾炎动物模型

方法 成年大鼠,后固定,无菌条件下开腹,将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜,把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内,距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层),后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1~2针,将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔,两层缝合关腹,无菌纱布包扎伤口,送回笼中饲养观察。或成年家兔,后固定于***台架上,备皮消毒铺巾后,无菌条件下腹正中切口开腹6cm,寻及盲肠提出阑尾,于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾,随后将阑尾纳回腹腔,逐层关腹。术后,在规定的时间点测定动物体温,行坏死阑尾炎腔内容物***培养,包囊或坏死阑尾大小的检测,以及肉眼病理观察和***形态学改变的镜检。

特点 大鼠术后15d,阑尾呈脓性坏死,外裹一层纤维性包囊,囊内含有大量的***,模型成功率高。兔术后6~12h,阑尾充血、增粗、水肿;12~24h时,阑尾肿胀、增粗更为明显,外被脓苔与周围肠管粘连,部分阑尾壁可见斑点状出血灶,腹腔内有脓性渗液出现。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血,甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液***培养有大肠生长。术后24h,兔体温可升至40℃左右。在整个造模过程中,模型动物神态萎靡,不食不饮,腹部胀满,2~4d内陆续。





睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,上面放水和食物。水温和室温保持在25 C,每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, REMS) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

旷场实验( open field test, OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一摄像机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,大鼠置于方箱底面中心,同时进行摄像和计时,3 min 后停止摄像,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。




大鼠烫l伤动物模型

方法 按30mg/kg体重的剂量经腹腔***3%戊巴l比妥钠麻l醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热自来水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,以纱布接触大鼠皮肤后计时。

(2)模型特点 大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐***素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。光镜观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清。表皮内有水疱形成,***水肿、间质疏松,胶原纤维断裂,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性。血管扩张、充血,皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞尚清楚,部分肿胀、溶解。皮下***中血管扩张、充血。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解。表皮内有水疱形成,***层间质疏松、充血,胶原纤维融合成片,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性,大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被***,结构不清,***深部可见残余毛囊。皮下***血管扩张、充血l、水肿明显,结构未***。上述结果表明,致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫l伤,致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫l伤.






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