当我通过平板培养得到好的结果时为什么我要换成3D细胞培养？

二维细胞培养对我们对细胞生物学的理解做出了很大的贡献，但是能从中获取的信息量还是有限制性的。科学家虽然对过去100年的传统细胞培养技术很满意，但是这不再具有必要性。***培养，根据定义，尽量模拟体内环境，并且很显然，活着的生物日是三维的，而不是二维的。因此，为了建立模拟体内生物学模型，体外培养系统一定变成三维的。

传统的二维细胞培养并不是细胞生长的天然状态，因而细胞的***表达、信号转导和形态学都可能与天然有异。近，美国莱斯大学和德克萨斯大学M.D. Andersonai症中心的研究人员阐明了一种更为简单的三维培养技术，文章发表在3月14日的《Nature Nanotechnology》上。

研究小组开发出一种生物装配器（bioassembler）。这个系统使用磁力让细胞悬浮，并促使细胞生长成三维的形状。悬浮过程是基于一种生物无机的水凝1胶（hydrogel），这种水凝1胶由三部分组成：噬菌体、磁性氧化铁和金纳米颗粒。研究小组使用的噬菌体是M13来源的，展示了RGD-4C配体肽段，以靶定金纳米颗粒和磁性氧化铁。这种基于磁性环的技术与所有标准的培养技术兼容，因此可推广到大部分实验室。

美国Synthecon赛斯康RCCS-1H单转头微重力三维细胞培养系统

细胞传代的一般方法？

开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和***是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液（1 万单位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液。

用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，加入灭活小牛血X清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。

RCCS-3D系统中细胞的分化及3D结构

不同表型的异种细胞（正常细胞和肿X瘤细胞）混合培养可促进amp;gt;? 构造的器X官类型分化，特别是肿X瘤细胞和正常基质细胞在RCCS-3D中导致分化的肿X瘤块形成。例如，当前X列X腺X细胞与正常的骨基质细胞混合培养时，肿X瘤细胞表型和***型的转变，细胞生长和前X列X腺素特异性抗原产物增加。前列X腺XX细胞可侵袭前X列X腺***外植块，并保持血管等结构的完整。