RCCS三维细胞培养系统的应用?
1取材 在无菌环境下从机体取出某种***细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的***细胞的首1次培养称为原代培养。2培养 将取得的***细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,***终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
RCCS-3D系统中细胞分化和3D结构
RCCS-3D具有的低剪切力可以促进细胞紧密附着,促进细胞间联系,通过特异性的细胞粘附分子促进细胞分化,保持高密度细胞培养的能力;可以直接影响***表达,或者间接促进细胞间信号的旁分泌自主分泌。这一过程可使聚集不被剪切力***而快速建立和增大。模拟微重力环境可以促进从多种正常的和转化细胞构建肉眼可见的、分化的、***样3D 结构(即***等同物或类器X官),研究范围包括病毒、人肿X瘤细胞和其它生物制品(如抗X体、抗原)。
RCCS-3D系统中细胞的生长
在微重力状态下细胞易于聚集,比在标准重力环境中产生更高的细胞密度Bamp;C。促进细胞间相互作用的原因是微重力使细胞粘附分子、细胞外基质蛋白和其各自的受体发生***特异性上调。微重力可能影响细胞骨架结构(微丝)和与蛋白质磷酸化作用有关的细胞内信号机制B@!C。细胞骨架有可能是感知微重力的主要位点之一,在单细胞水平,细胞骨架结构的改变可用来解释细胞内磷酸化作用级联反应途径的改变。
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