RCCS-3D模拟微重力三维动态培养系统可提供更长的培养周期
1 培养容器选用优质材质制作,对细胞完全无X毒、无害;
2 材质透明度高,适用于通过显微镜等工具对培养容器内部进行实时观察;
3 部分系统使用第三方耗材,如培养瓶、培养管之类,无法保证材料的质量,***培养流程,且通透性差;
4 可提供较长周期的培养,青岛市***培养,以便于获得更大尺寸的培养物或培养出具有一定功能的类***;5 无法进行较长周期的培养,因为系统无法提供必要的养分和充分的与外界气体的交换;
三维细胞培养系统RCCS,又称为RWVB即转壁式生物反应器!
RWVB是由两个同心圆柱体构成的旋转装置。将细胞与培养液置入内、外圆柱体之间,整个装置绕纵轴旋转,根据细胞的种类、性质、数量、培养物的大小调节容器的旋转速度,使培养物长时间保持悬浮状态。它是一种完全充满液体的生物反应器,以水平方向为轴作旋转运动,这种培养环境形成湍流较少,剪切力低,物质传递效率高,并有丰富的供氧。国内外大量的实验结果表明,采用RWVB可以模拟产生微重力条件下的生物效应,可以作为模拟微重力生物效应的有效手段。因此,随着细胞聚合体体积增加,它们沉降的更迅速,有必要增加旋转速度。
———摘录自“模拟微重力培养在骨和******工程中的应用”
目前,RCCS-3D三维细胞培养系统包括RCCS-D﹨RCCS-2D﹨RCCS-4D﹨RCCS-8D﹨RCCS-4DQ﹨RCCS-8DQ以及RCCS-H﹨RCCS-2H﹨RCCS-4H﹨RCCS-2HD﹨RCCS-4HD和专用于***培养的RCCS-SC﹨RCCS-2SC﹨RCCS-4SC﹨RCCS-4SCQ以及高X端的连续灌注式(即培养液可以根据设定的补给速度连续不断地自动更新,尤其适用于长周期的培养)细胞培养系统RCMW﹨RCMW-DUAL等多种规格的系统!不久,重力归/令人不安的仪器,如回转器,随机***机(RPM),自由落体机(FFM)和抛物线飞行飞机被开发。
现在认为,***培养繁殖,常规方法无法实现完全意义上的***重建, 即由离体细胞完全在体外重建***。其主要原因是:静止培养时,生物***培养,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并***细胞的***特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同***(co - localization) ,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构[10]。***培养,根据定义,尽量模拟体内环境,并且很显然,活着的生物日是三维的,而不是二维的。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点,开辟了体外细胞培养的新纪元,也为***构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤,它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的;②富含氧而不引起涡流,物流转移率高。气体渗透膜则提供了被动的气体交换,它为适宜的生长环境提供了气体,防止了湍动引起的气泡/气室[11];③随机化的重力向量(randomized gr***itational vectors) 可能直接影响***表达,或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌,有利于细胞间信号转导 ;④细胞有一定程度的自由三维空间,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按***学特性相互接触,有利于细胞分化,且不易形成坏死中心[10];两个基本的物理因素是本研究的目标:重力和电磁辐射对活生物体的影响,从单细胞到胚胎发育和到成熟X的复杂生物体。⑤微重力在***培养时还具有高保真度的优点。
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