06、专利号5,026,650“具有同轴管状氧化器的水平旋转细胞培养系统”专利 1991年 6月25日***
07、专利号5,153,131“高等效比容器及其使用方法”1992年10月6日***的专利
08、专利号5,155,035 1992年10月13日***的“用于培***物反应器中培养马马里亚细胞的方法”专利
09、专利号5,153,133“水性旋转生物反应器中培养马马里亚细胞的方法”1992年10月6日***
10、1999年12月7日***的专利号为5,998,202的“多室扩散船”专利
11、专利号5,989,913“用于培养或培养细胞的培养皿,RCCS-3DQ, 细胞聚集体, ***和有机物及其使用方法”1999年11月23日***的专利
现在认为,常规方法无法实现完全意义上的***重建, 即由离体细胞完全在体外重建***。Terai等[15]将旋转式细胞培养系统增加气体交换装置后,有效的解决了支架材料中O2渗透和CO2排除的问题,BMSCs与聚乳酸/乙醇酸(PGLA)构建的***工程骨在该反应器中,培养2周时出现钙化情况,培养7周时细胞即被形成的骨样***包裹。其主要原因是:静止培养时,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并***细胞的***特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,RCCS-8DQ,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同***(co - localization) ,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构[10]。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点,开辟了体外细胞培养的新纪元,也为***构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤,它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的;②富含氧而不引起涡流,物流转移率高。如前所述,RCCS生物反应器提供了非常好的质量传递和低机械应力允许了3D聚合物的形成。气体渗透膜则提供了被动的气体交换,它为适宜的生长环境提供了气体,防止了湍动引起的气泡/气室[11];③随机化的重力向量(randomized gr***itational vectors) 可能直接影响***表达,或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌,有利于细胞间信号转导 ;④细胞有一定程度的自由三维空间,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按***学特性相互接触,有利于细胞分化,且不易形成坏死中心[10];⑤微重力在***培养时还具有高保真度的优点。
————本文摘自网络,著作权归原作者所有!
目前,RCCS-3D三维细胞培养系统包括RCCS-D﹨RCCS-2D﹨RCCS-4D﹨RCCS-8D﹨RCCS-4DQ﹨RCCS-8DQ以及RCCS-H﹨RCCS-2H﹨RCCS-4H﹨RCCS-2HD﹨RCCS-4HD和专用于***培养的RCCS-SC﹨RCCS-2SC﹨RCCS-4SC﹨RCCS-4SCQ以及高X端的连续灌注式(即培养液可以根据设定的补给速度连续不断地自动更新,尤其适用于长周期的培养)细胞培养系统RCMW﹨RCMW-DUAL等多种规格的系统!同时在其他培养方法下不容易生长、培养的细胞在RCCS也可以更容易地进行培养。
三维细胞培养RCCS模拟微重力细胞培养与常规细胞培养相比优势?
现在认为,常规方法无法实现完全意义上的***重建, 即由离体细胞完全在体外重建***。在这些实验之后,科学家意识到这种在空间飞行器上进行的研究是有限的,但它可以在地球上用特殊技术模拟。其主要原因是:静止培养时,RCCS-4DQ,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,宁波市RCCS,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并***细胞的***特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同***,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构。___摘录自学术期刊
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