发酵罐的清洗工作也同样重要,我们也在不断努力改进发酵罐的清洗技术,从而更好的让发酵罐为我们工作。在被清洗设备较脏和发酵罐罐体直径较大(dgt;2 m)时,一般采用了旋转喷射型洗涤器,通过增加洗涤器出口压力(0.3~0.7 MPa),来加大洗涤半径,增强冲洗的机械作用,增加去垢效果。与球型洗涤器相比,旋转喷射型洗涤器可以采用较低的清洗液流量。由于冲洗介质通过的时候,洗涤器利用了流体的反冲力进行旋转,冲洗和流空交替进行,从而提高了清洗效果。
据啤酒发酵罐的大小、使用频次的多少,有以下几种工艺:
碱性洗涤液的配制
(1)向CIP罐中加入部分凉水。
(2)向内依次加入300公斤HPC-1碱性清洗剂,150公斤火碱。
(3)补充余量水至5吨,升温至65℃备用。
酸性洗涤液的配制
(2)向内依次加入300公斤HPC-4酸性清洗剂,再加入部分凉水。
(3)后加入200公斤渗透剂,补充余量水至5吨,常温备用。
发酵罐具体执行操作工艺
(1)温水冲洗啤酒发酵罐的罐体15分钟。
(2)碱性洗涤液循环清洗3.5小时,保证回流温度不低于62℃(循环时间以回流温度达到工艺规定开始记时)。
(3)清水冲洗罐体至回流水,pH值呈中性。
(4)酸性洗涤液循环清洗2.5小时,常温。
(5)清水冲洗罐体至回流水,pH值呈中性。
有效使用小型发酵罐以及发酵变化
如何有效使用小型发酵罐以及发酵过程的变化,如何我们经常使用到小型发酵罐来做各种科研实验,那么在操作中得到很好的利用是一个非常重要的课题,还有在发酵的过程中一些细微的变化。
小型发酵罐分批培养过程中大肠杆i菌的菌体生长状况,通过控制发酵过程的温度、溶氧、搅拌速度、空气流量、泡沫水平等参数,并每小时取样测OD值和还原糖量,制作菌体生长曲线,以此判断大肠杆i菌的生长发酵状况。结果表明大肠杆i菌在发酵的前三个小时处于生长延迟期,发酵3~6小时为对数生长期,发酵6小时后该菌开始进入平衡期,第8小时时结束发酵实验。
发酵罐是进行液体发酵的特殊设备。生产上使用的发酵罐容积大,均用钢板或不锈钢板制成;供实验室使用的小型发酵罐,其容积可从约1L至数百升或稍大些。一般来说,5L以下是用耐压玻璃制作罐体,10 L以上用不锈钢板或钢板制作罐体。发酵罐配备有控制器和各种电极,可以自动地调控试验所需要的培养条件,是微生物学、遗传工程、医i药工业等科学研究所必需的设备。
在当今市场上,各厂家生产的发酵罐会有所差别,但基本原理是相同的,基本结构是类似的。本实验使用的是BIOTECH-7BGZ发酵罐,其结构主要又罐体和控制器两大部分组成,罐体为一硬质玻璃圆筒,底和顶两端用不锈钢板及橡胶垫圈密封构成,容积为5L,顶盖上有多个孔口,分别是加料及接种口补料口、放置 DO(溶解氧)电极口、放置pH电极口、放置消泡电极口、放置取样管口等;本罐可配置不同性能的控制器,控制器能完成基本的功能。
发酵罐气体分布器的使用
发酵罐根据发酵过程中耗氧量大小判断是否采用气体分布器,如果发酵过程耗氧较低,甚至紧靠气泡翻动就可以保持一定溶氧时,可通过空气分布器来减小进入培养液中气泡的直径,这样在一定程度上提高了溶氧量,达到节能和满足供氧需求的目的。而发酵过程中耗氧较大时,气液接触表面的增加更需要通过强制剪切破碎来实现。空气气泡的破损主要依靠搅拌器的剪切破碎作用,因此,多孔分布器对氧的传递效果并没有明显提高。相反还造成不必要的阻力损失,而且物料易堵塞小孔,引发灭菌不完全而增加染菌机会。
气体分布器是将大股的圆柱空气流分成很多细股的空气流,在下层搅拌器正下方喷出,被下层圆弧涡轮浆搅拌破损成更小气泡和培养基充分混合而设计的。开孔直径随单台罐体积的增大相应增大,一般由φ10mm增大到φ60 mm为宜。故部分厂家不采用气体分布器,而采用管口朝下的单孔管,以避免固体物料在管口聚积。而部分厂家采用环形多孔分布器,其环形圆管中心线圆直径ds=(0.67~0.8)d,环管直径和进罐空气管直径相同。分布器置于罐底底层搅拌器正下方,其环管中心线距罐底距离为 D/8。环管上半圆中心线上均布很多小孔,开孔总面积为进气管圆截面积的1.0~1.2倍。
不锈钢发酵罐具有灵活的配置选择
不锈钢发酵罐可配置不同性能的控制器。控制器能完成基本的功能,参数输入及显示装置,用以输入控制发酵条件的各种参数及显示发酵过程中罐内培养液的温度,溶氧的测定数值。
不锈钢发酵罐电极校正装置用以校正pH电极和DO电极等,酸、碱泵用以向发酵罐加入酸液或碱液以调节培养液中的pH,消泡剂加入泵用以向发酵罐加入消泡剂,以消除发酵过程中产生过多的泡沫。不锈钢发酵罐报警i灯及蜂音器按钮,当发酵过程中,电路上发生故障,如显示屏上显示温度或DO为闪动,即超出本机的测定值,则报警红灯亮并发出“嘀、嘀……”声。
清洗不锈钢发酵罐时,请用软毛刷进行刷洗,不要用硬器刮擦,以免损伤发酵罐表面配套仪表应每年校验一次,以确保正常使用,电器、仪表、传感器等电气设备严禁直接与水、汽接触,防止受潮。不锈钢发酵罐停止使用时,应及时清洗干净,排尽发酵罐及各管道中的余水;松开发酵罐罐盖及手孔螺丝,防止密封圈产生永i久变形,操作平台、恒温水箱等碳钢设备应定期(一年一次)刷油漆,防止锈蚀。
如果不锈钢发酵罐暂时不用,则需对发酵罐进行空消,并排尽罐内及各管道内的余水,在空消及实消时,一定要排尽发酵罐夹套内的余水,否则可能会导致不锈钢发酵罐内筒体压扁,造成设备损坏;在实消时,还会造成冷凝水过多导致培养液被稀释,从而无法达到工艺要求。不锈钢发酵罐在空消、实消结束后冷却过程中,严禁发酵罐内产生负压,以免造成污染,甚至损坏设备,在各操作过程中,必须保持空气管道中的压力大于发酵罐的罐压,否则会引起发酵罐中的液体倒流进入过滤器中,堵塞过滤器滤芯或使过滤器失效。
不锈钢发酵罐自动或人工控制按钮用以决定本控制器是处在自动控制或人工控制状态,电极连接导线:连接导线,分别与pH、和温度电极连接安装好电极,灭菌前检查各接口,各管线外观是否正常,出蒸汽管是否牢固。各阀门应由两人检查是否处于完全关闭状态。不锈钢发酵罐灭菌时至少要求两人在场,一人负责操作各种阀门,另一人负责观察报告各项参数,确认各阀门处于关闭状态后,打开蒸汽发生器进水阀,启动蒸气发生器,蒸气发生器开始自动进水,此时应打开蒸气发生器下部的排水阀,尽量放去水锈后关闭排水阀。
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