2019-noCov检测再提速！山师大研发出20分钟检测***盒

新型冠状病毒疫情爆发之后，山东师范大学生命学院“动物创新研究团队”成员心系疫情，在省科技厅“新型冠状病毒被染上的疫情应急技术攻关及集成应用”重大科技创新工程的支持下，同心协力，争分夺秒进行技术攻关，联合山东莱博生物科技有限公司和潍坊安普未来生物科技有限公司共同研发出新型的快速核酸检测***盒，目前该***盒已经进入***食品***监督***审查程序。

突破传统桎梏，将分子检测带入一个新领域

具体操作方法如下：

1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸（核酸释放剂与样本混匀，室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板），或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可；

2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中，通过上述各种加热手段，保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。

3. 上述反应时间结束后，向反应液中加入少许无菌水稀释，后直接插入试纸条，则马上可通过试纸条上的条带颜色变化，从而判定阴阳性。

2 自主研发用时，引物设计注意事项：

核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。

恒温快速扩增***盒的操作简单

首先：核酸提取

1. 取样放入管A中; （管A中核酸释放液，能灭活病毒）

2. 管A放入95℃-100℃10分钟（原理是核酸释放液中酶失活，但是能进一步灭活病毒）；

第二步：扩增反应

3. 直接向管中的干粉***加如buffer 1使其变成液态；

4. 向8连管管盖上滴上buferr 2（高粘度不会轻易脱落）以备用。

5. 取管A中液体5ul加入8连管内。后盖盖。之后直接上机即可。20min后机器实时显示结果。

注：可采用我司专用的荧光检测设备。WL-1601（16孔荧光检测仪）

亦可采用市面上咋销售的各类荧光定量qPCR仪。均可实现20min内完成检测的效果。

其结果分析跟荧光定量PCR基本相同，亦有实施荧光S型曲线，简单易懂。

我司不仅针对自己的设备配有详细的操作说明，针对其他品牌的设备也匹配了相应的条件设置SOP或短视频，以便客户拿到***产品后，可在几分钟内掌握检测方法。

（荧光定量PCR检测结果）

（安普未来荧光检测仪结果）

使用该技术方案，如果3名检测人员同时工作，一天8个小时可完成1400份以上的样本检测。大幅提升检测效率，且对检测环境以及设备要求不高。

自主研发用时，引物设计需注意！

该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于初筛、食品安全、宠物***检测等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员***水平要求低，检测结果可信度高。