恒温快速扩增***盒的操作简单

首先：核酸提取

1. 取样放入管A中; （管A中核酸释放液，能灭活病毒）

2. 管A放入95℃-100℃10分钟（原理是核酸释放液中酶失活，但是能进一步灭活病毒）；

第二步：扩增反应

3. 直接向管中的干粉***加如buffer 1使其变成液态；

4. 向8连管管盖上滴上buferr 2（高粘度不会轻易脱落）以备用。

5. 取管A中液体5ul加入8连管内。后盖盖。之后直接上机即可。20min后机器实时显示结果。

注：可采用我司专用的荧光检测设备。WL-1601（16孔荧光检测仪）

亦可采用市面上咋销售的各类荧光定量qPCR仪。均可实现20min内完成检测的效果。

其结果分析跟荧光定量PCR基本相同，亦有实施荧光S型曲线，简单易懂。

我司不仅针对自己的设备配有详细的操作说明，针对其他品牌的设备也匹配了相应的条件设置SOP或短视频，以便客户拿到***产品后，可在几分钟内掌握检测方法。

（荧光定量PCR检测结果）

（安普未来荧光检测仪结果）

使用该技术方案，如果3名检测人员同时工作，一天8个小时可完成1400份以上的样本检测。大幅提升检测效率，且对检测环境以及设备要求不高。

什么样的分子检测技术才是高性价比的，且又能怎样帮到畜牧养殖企业呢？

“首先”分子检测的很大优势是可以将动物病害的预防大幅度提前。现在较为普及的检测法，是在牲口已有较为明显的发病征兆时，利用其本身产生的蛋白才能检测出来。所以属于中晚期预防技术。而，分子扩增技术是将潜伏在牲口体内或周边的微量病毒，在体外进行繁殖扩增，进而直接检测病毒本身。因此属于早中期检测技术。

恒温快速扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。

1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；

2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；

3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；

4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；

5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；

6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。