TwistDx
自PCR技术诞生以来已经有三十年了。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR,这一技术在不断蜕变却从未淡出我们的视野。近年来,等温扩增技术的兴起无疑是对PCR的巨大挑战。
等温扩增技术的***快速诊断方法,涉及生物检测技术领域,具体是用体外生物检测***快速检测病原微生物的一种技术。
包括如下步骤:一、对被检样品进行预处理;二、包括目标靶***数据库的建立;生物信息学的分析比较;***组多态性的分型处理和简并碱基的运用,获得各种靶***的特异性引物两对,分别与靶***中的六个***区域序列特异性匹配;三、进行等温扩增反应;四、分析判断结果。该方法的优点:不需特殊***与设备;高特异性;.灵敏度高;鉴定简便;用途广: 可用于食品、***、化妆品等领域的质量控制和环境、水质等监测;用于***临床诊断,用于代谢性***和遗传***的***诊断。
RPA原理
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。
RPA的特性
1. 快速检测15min进行单分子检测试验
2.简易包装稳定冻干形式***
3. 无需热循环过程摆脱任何仪器束缚
4.便携设备要求低,贫瘠条件亦能完成检测
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TwistDx恒温扩增应用
TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。
RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的cDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。
***盒包括两类:①.TwistAmp冻干研发***盒(包括TwistAmp Basic***盒、TwistAmp exo ***盒和TwistAmp nfo ***盒共三种);②. TwistAmp液态研发***盒(包括TwistAmp Liquid Basic ***盒和TwistAmp Liquid exo ***盒共两种)
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