荧光显微镜——落射光装置

新型的落射光装置是从光源来的光射到干涉分光滤镜后，波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射，当滤镜对向光源呈45。倾斜时，则垂直射向物镜，经物镜射向标本，使标本受到激发，荧光显微镜公司，这时物镜直接起聚光器的作用。同时，滤长长的部分(绿、黄、红等)，对滤镜是可透的，因此，不向物镜方向反射，滤镜起了激发滤板作用，由于标本的荧光处在可见光长波区，可透过滤镜而到达目镜观察，荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高，在高放大时比透射光源强。它除具有透射式光源的功能外，更适用于不透明及半透明标本，如厚片、滤膜、菌落、***培养标本等的直接观察。研制的新型荧光显微镜多采用落射光装置，称之为落射荧光显微镜。

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荧光显微镜——物镜

各种物镜均可应用，但尽量用消色差的物镜，因其自体荧光极微且透光性能(波长范围)适合于荧光。由于图像在显微镜视野中的荧光亮度与物镜镜口率的平方成正比，而与其放大倍数成反比，所以为了提高荧光图像的亮度，应使用镜口率大的物镜。尤其在高倍放大 时其影响非常明显。因此对荧光不够强的标本，应使用镜口率大的物镜，配合以尽可能低的目镜。

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荧光显微镜的标本制作要求

1、载玻片

载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间，太厚的坡片， 一方面光吸收多，另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁，厚度均匀，无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。

2、盖玻片

盖玻片厚度在0.17mm左右，科研级三目倒置荧光显微镜公司，光洁。为了加强激发光 ，也可用干涉盖玻片，这是一种表面镀有若干层对不同波长的光起到不同干涉作用的物质(如氟化镁)的盖玻片，科研级三目正置荧光显微镜公司，它可以使荧光顺利通过，而反射激发光，体视荧光显微镜公司，这种反射的激发光可激发标本。

3、标本

***切片或其他标本不能太厚，若太厚激发光大部分消耗在标本下部，而物镜直接观察到的上部不充分激发。另外，细胞重叠或杂质掩盖，影响判断。

4、封裱剂

封裱剂常用甘油，必须无自发荧光，无色透明，荧光的亮度在pH8.5~9.5时较亮，不易很快褪去 。

5、镜油

一般暗视野荧光显微镜和用油镜观察标本时，必须使用镜油，尽量使用无荧光镜油，也可用上述甘油代替，液体石蜡也可用，只是折光率较低，对图像质量略有影响。

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