转印电泳（湿转）实验的操作

转印电泳湿转方式的操作介绍

湿转（一般是恒压转印，100V，时间2h左右）：转印缓冲液，三明治结构 ，底层海绵，往上依次是3-4层滤纸，凝胶，膜，3-4层滤纸，海绵

海绵和滤纸在使用前要用转移液浸泡，在制作三明治结构时一定要避免凝胶干燥，滤纸内的气泡要用玻璃棒赶走

膜在用之前都要活化，PVDF膜要先浸泡5S-30s，然后在转移缓冲液中平衡，目的是活化膜上的正电基团，NC膜直接在转移液中平衡即可

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核酸电泳技术的应用

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琼脂糖凝胶电泳适合分离、纯化200bp-50kB长度的核酸片段，广泛应用于***组提取与分析、载体构建、质粒提取等方面，分辨率较低，相差100bp以内的核酸片段较难分离。聚丙烯酰胺凝胶电泳适合分离1kB以下的小核酸片段，适用于序列分析与比对、核酶分析与鉴定、小片段核酸的提取与分析等方面分辨率较高，可以精准分离相差十几至几十bp的小片段核酸分子。脉冲场凝胶电泳分离片段大小50kb-10Mb,可有效回收大片段DNA，是一种非常有效的分子分型方法，因此根据实验目的，选择相应的电泳方法，能得到可靠地实验结果。1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法。

核酸电泳槽

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1、凝胶尺寸(W×L)：6cm×6cm；12cm×6cm；6cm×12cm；12cm×12cm。

2、加样梳规格：25齿 11齿；13齿 6齿；18齿 8齿； 2齿 3齿。

3、加样梳厚度：1.0mm、1.5mm,、2mm。

4、主体采用较好的PC材料注塑成型，外形美观。

5、电极采用带有耐电解腐蚀、耐高温、纯度≥99.95%的铂金制做，具有良好的导电性能，并且便于清洗和更换。

6、正常工作条件为：环境温度(0～40)℃；相对湿度≤80%；周围无强烈振动；实验台应保持水平。

7、电泳槽可连续工作时间长达24h。

8、开盖断电，保证安全。

9、允许使用外接的电泳电源较大电压为 200V，电流200mA。

10、外型尺寸（L×W×H）31cm×15cm×9cm。

缓冲液总容积650ml。11、重量：1100g