电泳仪
电泳仪基本内容
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中常用的是琼脂糖凝胶电泳。电泳电源是一种含有交流-直流-交流变换电路的电源,整个过程为:交流电网输入、整流滤波。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。
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电泳分类区带电泳
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是在一定的支持物上,在电场作用下,在均一的缓冲液体系,样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动,分离成一个个彼此隔开的区带。这是当前应用较广泛的电泳技术。电泳种类很多,电泳的原理基本相同,但不同的支持物或凝胶又有各自的特点。区带电泳按支持物的物理性状不同,又可分为纸和其他纤维膜电泳、淀粉电泳、凝胶电泳。
等电点聚焦电泳
凝胶中加入双性电解质,在电场强度下形成PH梯度。样品在电泳中,环境PH大于其PI时带负电荷,向正极移动,环境的PH小于其PI时带正电荷,向负极移动,当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质之后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高。2更换***管1)关闭电源开关,拔下电源插头,2)打开电源插座中的***管座,取出***管,3)更换相同型号的***管,4)装好***管座。
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琼脂糖凝胶电泳原理
DNA分子在常规的电泳缓冲液(高于等电点的pH溶液)中5’磷酸的氢离子解离被中和,而只剩磷酸根离子,故带负电,因而在电场中向正极移动(电荷效应)。又由于琼脂糖凝胶具有分子筛效应,在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子本身的大小和构型。3、不要用设计要求以外的其他电线和电缆,不要使用未经3C认证的电源线或插座,可能会触电或引发火灾。因此琼脂糖凝胶电泳不仅可分离不同分子量的DNA,也可以分离分子量相同、但构型不同的DNA分子,如质粒三种构型。
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