核酸电泳染色液

核酸电泳常用染色液

1、***化乙锭（ethidium bromide， EB）

较为常用的核酸荧光染料，可嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线激发下，发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光，比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍，因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。若EB背景太深，可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCI2中5min，使非结合的EB褪色，这 样可检查到10ng的DNA样品，EB也可用于检测单链DNA或RNA，但其对单链核酸的亲和力相对较小，荧光产率也相对较低。

2、***橙（acridine orange，水平电泳槽价格， AO）：

***橙可嵌入双链核酸碱基对之间，在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合，在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸，灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。但***橙的染色操作要求严格，应在 22℃，0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。

3、亚甲蓝（methylene blue）

可将RNA染成蓝色，但灵敏度不高，而且操作时间长。染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝，10mmol/L Tris-Ac（pH8.3），4℃放置1~2h，用净水洗5~8h（反复换水），水平电泳槽厂家，带型肉眼可见，较低检测量为 250ng。

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LF-31DS型 水平琼脂糖电泳槽

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技术参数：

电极铂金丝直径为0.26mm，纯度为99.95%，电场强大、稳定；

凝胶板规格(L×W)：60×60mm；120×60mm(宽胶)；

60×120mm(长胶)；120×120mm;

样品梳：11 25齿(1.0mm厚)；6 13齿，8 18齿(1.5mm厚)；

2 3齿(2.0mm厚) ;

缓冲液总容量：约650ml

产品用途：适用于分离、制备DNA、RNA。

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蛋白电泳常见问题及解决方法:

一，条带出现“微笑”现象（中间凹下两边翘起）

主要是凝胶中间部分的凝固不均所致，多出现较厚凝胶中，安徽水平电泳槽，应待凝胶充分凝固后再做后续操作。

二，条带出“皱眉”现象（中间凸起两边下垂）

两板之间底部气泡所致，应排除底部气泡。

三，条带出现“拖尾”现象

主要是样品溶解效果不佳；分离胶浓度过大；电泳缓冲液时间过长。

建议：加样前离心；选择合适的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；重新配制电泳缓冲液；降低凝胶浓度。

四，水平电泳槽报价，条带出现纹理现象

样品中不溶性颗粒引起的。

加样前离心，加适量样品促溶剂。

五，指示带已跑出板底，但样品条带还未跑下来

与缓冲液和分离胶浓度有关。

更换正确PH值的缓冲液，降低凝胶浓度。六，染色背景高，染色过程中***变为蓝色

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