核酸电泳凝胶的染色
凝胶的染色和观察 凝胶中核酸带的染色,电泳槽,常用***化乙锭法和银染法。前者与琼脂糖凝胶的染色方法相同。
银染法的灵敏度较高,可如下操作:
(1) 将凝胶置固定液(10%乙醇,0.5%冰醋酸)中固定10分钟;
(2) 双蒸水洗1-2次;
(3) 置0.01mol/L AgNO3溶液中,室温反应15-30分钟;
(4) 充分水洗;
(5) 置NaOH-甲醛混合液(200ml 3%NaOH,含1ml甲醛)中反应至条带显色清晰,本底适宜;
(6) 用5%冰醋酸终止反应。
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一、功能概述
本产品可快速、高质量地转印小型凝胶,电泳槽生产厂家,它可容纳2个凝胶转印夹,可同时转印两块小型凝胶。
1、一小时内转印2块10×7.5㎝凝胶;也可进行低强度的过夜转印。
2、电极丝相距4㎝可以产生强电场保证有效的蛋白转印。
3、具有颜色标记的转印夹和转印模块能够确保凝胶的正确定向。
二、注意事项
本产品内安装的铂金丝电极易断,电泳槽厂家,使用中应小心操作,铂金丝不在保修范围之内,提醒客户清洗电泳槽时细致观察小心触碰!
附:缓冲液配比(推荐)
5X电泳缓冲液:15.1g Tris 94.0g Gly 5.0g SDS 配成1L
转移缓冲液:3.03g Tris 14.42g Gly 200mL CH3OH 配成1L
核酸电泳简史
核酸凝胶电泳分离核酸技术,始于20世纪60年代初。 那时,核酸主要基于沉积速度通过密度梯度离心法进行分离,分离情况由核酸的大小和构象决定。 密度梯度离心法不仅过程耗时,且需重型设备和大量的样品投入。 为寻求突破,电泳槽价格,研究人员开始探索电场作用下离子或电解液中DNA移动的特征—即 电泳的过程。
通过借鉴已经在蛋白质电泳中使用的技术,核酸电泳进一步发展,开始使用凝胶基质作为分离介质。 早期凝胶电泳实验的分离结果表明了,密度梯度离心分离法(早期确定的核酸分离方法)中沉积系数或 S 值的相关性。 随着20世纪60年代后期对琼脂糖生产的进一步了解和发展,琼脂糖逐渐取代琼脂成为首要选择凝胶电泳介质。
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